薄層色譜又叫薄層層析，是色譜法中的***種，常用TLC表示，是***種很重要的能快速分離和定性分析少量物質(zhì)的實驗技術(shù)，屬固—液吸附色譜，它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點，***方面適用于少量樣品（幾到幾微克，甚至0.01微克）的分離；另***方面在制作薄層板時，把吸附層加厚加大，因此，又可用來精制樣品，此法特別適用于揮發(fā)性較小或較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的質(zhì)。此外，薄層色譜法還可用來跟蹤有機反應(yīng)及進行柱色譜之前的***種“預(yù)試”。

薄層色譜法就是將適宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或鋁基片上，成***均勻薄層。待點樣、展開后，與適宜的對照物按同法所得的色譜圖作對比，用以進行藥品的鑒別、雜質(zhì)檢查或含量測定的方法。

薄層色譜是在被洗滌干凈的玻板（10×3cm左右）上均勻的涂***層吸附劑或支持劑，帶干燥、活化后將樣品溶液用管口平整的毛細管滴加于離薄層板***端約1cm處的起點線上，涼干或吹干后置薄層板于盛有展開劑的展開槽內(nèi)，浸入深度為0.5cm。待展開劑前沿離頂端約1cm附近時，將色譜板取出，干燥后噴以顯色劑，或在紫外燈下顯色。

薄層色譜具有靈敏度及分辨率高、分離快速、操作方便、同時分離多個樣品、樣品預(yù)處理簡單、設(shè)備簡單等特點。由于這些特點，薄層色譜在實際工作中的應(yīng)用十分廣泛。薄層色譜儀即薄層掃描儀，是可以對斑點進行掃描的專用分光光度計，用可見光或紫外光作光源，線性掃描或鋸齒掃描薄層板展開后的斑點，該斑點就吸收該組分特征波長的單色光，剩余的單色光經(jīng)透射或反射或發(fā)射熒光，由檢測器積分起來，獲得這塊斑點面積的待測物質(zhì)含量。

另外，薄層色譜還有相應(yīng)的條件選擇：

（***）固定相選擇

柱色譜中提到的吸附劑都可以用作為薄層色譜的固定相，分離性能及使用選擇同柱色譜的選擇原則相同。***般用于薄層色譜時，要求吸附劑的粒度更小。商品吸附劑區(qū)分為色譜***（用于柱色譜）和薄層色譜***（用于薄層色譜）。

（二）展開劑選擇

薄層色譜展開劑的選擇和柱色譜***樣，主要根據(jù)樣品中各組分的極性、溶劑對于樣品中各組分溶解度等因素來考慮。展開劑的極性越大，對化合物的洗脫力也越大。選擇展開劑時，除參照表列溶劑極性來選擇外，更多地采用試驗的方法，在***塊薄層板上進行試驗：

1.若所選展開劑使混合物中所有的組分點都移到了溶劑前沿，此溶劑的極性過強；

2.若所選展開劑幾乎不能使混合物中的組分點移動，留在了原點上，此溶劑的極性過弱。

當***種溶劑不能很好地展開各組分時，常選擇用混合溶劑作為展開劑。先用***種極性較小的溶劑為基礎(chǔ)溶劑展開混合物，若展開不好，用極性較大的溶劑與前***溶劑混合，調(diào)整極性，再次試驗，直到選出合適的展開劑組合。合適的混合展開劑常需多次仔細選擇才能確定。

（三）相對移動值

從點樣原點開始到展開后的溶劑前沿，是溶劑的移動距離，記為lo，混合物中各組分的移動距離分別記為l1，l2，l3 …。在不同的展開條件下，各化合物的移動距離不會相同，而在同***條件下，相對于展開劑的移動距離，各化合物有可比較的展開數(shù)據(jù)，稱為相對移動值，或比移值。在相同條件下測得的比移值可以用于化合物的薄層色譜特征值進行比較對照。

（四）顯色

分離的化合物若有顏色，很容易識別出來各個樣點。但多數(shù)情況下化合物沒有顏色，要識別樣點，必須使樣點顯色。通用的顯色方法有碘蒸氣顯色和紫外線顯色。

1.碘蒸氣顯色：將展開的薄層板揮發(fā)干展開劑后，放在盛有碘晶體的封閉容器中，升華產(chǎn)生的碘蒸氣能與有機物分子形成有色的締合物，完成顯色。

2.紫外線顯色：用摻有熒光劑的固定相材料（如硅膠F，氧化鋁F等）制板，展開后在用紫外線照射展開的干燥薄層板，板上的有機物會吸收紫外線，在板上出現(xiàn)相應(yīng)的色點，可以被觀察到。