孔板成像好方法 — 真彩色白光透射
孔板成像是分子生物實驗中必不可少的實驗方案,其中孔板成像還可以用于病毒噬菌斑的計算和計數。
其主要的原理是將各稀釋度的病毒液接種到單層細胞培養環境中,吸附***段時間后,在單層細胞上覆以瓊脂糖,病毒感染細胞并在細胞中增殖,使細胞破裂死亡。由于固體介質的限制,釋放的病毒只能由***初感染的細胞向四周擴展。經過幾個增殖周期,便形成***個局限性病變細胞區,即病毒蝕斑。經中性紅活細胞染料著色后,活細胞顯紅色,而蝕斑區細胞而不著色,形成不染色區域。病毒蝕斑如噬菌體感染細菌形成的噬菌斑。理論上,當病毒液充分稀釋后,獲得的每個蝕斑均源于***初感染細胞的***個病毒顆粒,即蝕斑中的病毒為***個病毒體的繁殖后代品系,由此達到純化病毒的目的。除了可用于純化病毒以外,空斑實驗還可用于干擾素、抗體中和病毒繁殖能力的實驗。
而目前該類實驗主要采用顯微鏡成像的方式進行觀察和記錄。新***代的多功能生物分子成像設備Amersham ImageQuant 800能夠利用白光透射模式,對孔板中的病毒噬菌斑進行真彩色成像光密度***定量和自動化數據分析。
顯微鏡的拍照雖然方便,但是儲存數據和做定量分析非常麻煩。??
成像小助手可以幫助大***更好地得到和分析結果。采用新***代的多功能生物分子成像設備Amersham ImageQuant 800,它能夠利用白光透射模式,對噬菌斑進行真彩色成像光密度***定量和數據分析。??
具體操作步驟:
1
打開設備,選擇OD measurement OD模式:選用OD白光透射托盤直接拍照即可得到結果。
2
機器會自動保存真彩色圖片和TIF圖,以及TIF圖轉換為OD值精確定量。
3
打開IQTL高***多功能分析軟件進行孔板等面積定量***分析即可。
(文章來源于儀器網)